合作伙伴：珠海大型保健品&醫(yī)藥研發(fā)公司

儀器類型：液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)

品牌：安捷倫

型號：AB SCIEX 6500+/4500+島津30A

2026年3月31日，3月完好收官，兩套儀器完成交付！

珠海大型保健品&醫(yī)藥研發(fā)公司項(xiàng)目圓滿交付！

AB SCIEX 6500+/4500+島津30A全套系統(tǒng)，搭配干血斑萃取、ACMP進(jìn)樣系統(tǒng)血液維生素、dan堿、左旋肉堿、牛磺酸等檢測方案

安裝調(diào)試+培訓(xùn)+完整方法開發(fā)全部落地！譜標(biāo)科技｜不只銷售儀器更提供定制檢測方案+全方面應(yīng)用支持。感謝信任，4月再戰(zhàn)！[加油][加油]

兩套液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)（SCIEX 6500+ 或 4500+ 搭配島津 30A 液相）以及干血斑（DBS）前處理需求，針對維生素、dan堿、左旋肉堿、?；撬岬葮O性小分子的檢測，我為你設(shè)計(jì)了以下全套解決方案。

這套方案的核心難點(diǎn)在于干血斑基質(zhì)的復(fù)雜性以及目標(biāo)物（特別是牛磺酸和肉堿）的高極性，因此方案重點(diǎn)在于前處理的自動化萃取和液相條件的優(yōu)化。

?? 一、 硬件配置與系統(tǒng)適用性分析

兩套系統(tǒng)均能滿足檢測需求，但在靈敏度和通量上略有差異：

島津 30A 液相的作用： 提供高壓、低脈沖的流速，確保色譜峰形尖銳，特別是對于極性化合物在色譜柱上的保留至關(guān)重要。

?? 二、 干血斑 (DBS) 自動化萃取方案

干血斑樣本量小且基質(zhì)效應(yīng)強(qiáng)，手工萃取誤差大。結(jié)合參考信息中的自動化理念（如CLAM或ATLAS-LEXT的工作流），建議采用以下自動化或半自動化萃取流程，以提高回收率和重現(xiàn)性：

1. 前處理流程（建議配合自動化液體工作站）

取樣： 使用打孔器從干血斑卡片上打下直徑 3mm-6mm 的圓片，置于96孔板或深孔板中。

添加內(nèi)標(biāo)： 加入含有同位素內(nèi)標(biāo)（如 d9-dan堿, d3-肉堿）的萃取溶劑。

注意： 對于維生素（特別是脂溶性）和極性小分子，通常使用甲醇:乙腈:水的混合體系，或者含有0.1%甲酸/乙酸銨的甲醇溶液進(jìn)行萃取。

振蕩萃?。?劇烈振蕩 30-45 分鐘（室溫或4℃）。

離心/過濾： 離心后取上清液。如果是自動化系統(tǒng)（如CLAM-2040），可直接在線進(jìn)行蛋白沉淀和過濾。

進(jìn)樣： 將上清液轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶或直接由自動進(jìn)樣器吸取。

?? 三、 液相色譜 (LC) 分離策略

挑戰(zhàn)： dan堿、左旋肉堿、?；撬釋儆趶?qiáng)極性化合物，在普通C18柱上幾乎不保留，容易受基質(zhì)干擾。

方案 A：HILIC 模式（親水相互作用色譜）—— 推薦

這是檢測極性小分子的首方案。

色譜柱： 選用 HILIC 柱（如 Waters BEH Amide, Phenomenex Luna NH2, 或 ZIC-HILIC）。

流動相：

A相：10mM 乙酸銨（或甲酸銨）+ 0.1% 甲酸的水溶液。

B相：10mM 乙酸銨（或甲酸銨）+ 0.1% 甲酸的乙腈溶液（乙腈比例通常 >70%）。

作用： 利用高比例有機(jī)相讓極性物質(zhì)在柱頭保留，通過梯度洗脫實(shí)現(xiàn)牛磺酸、dan堿與基質(zhì)鹽分的分離。

方案 B：離子對色譜法

如果實(shí)驗(yàn)室只有C18柱，可添加離子對試劑（如七氟丁酸 HFBA 或 全氟戊酸 PFPA）。

缺點(diǎn)： 離子對試劑容易污染質(zhì)譜離子源，且平衡時(shí)間長，不建議在6500+這種高靈敏度儀器上長期使用，除非必要。

?? 四、 質(zhì)譜 (MS/MS) 檢測條件優(yōu)化

SCIEX 儀器（6500+/4500）配備的 Turbo V 離子源 非常適合此類分析。

離子源模式：

正離子模式 (+)： 適用于 dan堿、左旋肉堿（季銨鹽結(jié)構(gòu)，極易質(zhì)子化）。

負(fù)離子模式 (-)： 適用于 ?；撬幔ɑ撬峄鶊F(tuán)）和部分維生素（如維生suD，需APCI源或特殊ESI條件）。

策略： 利用 SCIEX 的 Polarity Switching（極性快速切換） 功能，一針進(jìn)樣同時(shí)采集正負(fù)離子數(shù)據(jù)，無需分開進(jìn)樣。

關(guān)鍵參數(shù)設(shè)置 (參考)：

CUR (氣簾氣)： 30-35 psi (較高氣簾氣有助于去除DBS基質(zhì)中的鹽分干擾)。

TEM (溫度)： 500°C - 600°C (高溫有助于去除流動相中的鹽，特別是HILIC模式高鹽條件下)。

IS (離子電壓)： 5500V (+) / -4500V (-)。

MRM 離子對監(jiān)測示例 (需根據(jù)實(shí)際調(diào)諧)：

?? 五、 方案總結(jié)與建議

系統(tǒng)選擇： 如果你的樣本量非常大且需要同時(shí)檢測痕量wei生素D和豐度高的肉堿，SCIEX 6500+ 的寬動態(tài)范圍優(yōu)勢更明顯。如果是常規(guī)體檢項(xiàng)目，SCIEX 4500 性價(jià)比更高。

前處理是關(guān)鍵： 干血斑的均一性和萃取效率直接影響結(jié)果。強(qiáng)烈建議引入自動化液體處理平臺（如參考資料中提到的CLAM或類似移液工作站）來替代手工打孔和浸泡，以減少人為誤差。

色譜分離： 必須使用 HILIC 色譜柱。不要試圖用普通C18柱去分離?；撬岷蚫an堿，否則會出現(xiàn)嚴(yán)重的基質(zhì)效應(yīng)和保留時(shí)間漂移。

這套組合（SCIEX高敏質(zhì)譜 + 島津穩(wěn)定液相 + HILIC分離 + 自動化DBS萃取）是目前臨床質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)室檢測微量極性代謝物的黃金標(biāo)準(zhǔn)。